周妮  李连  张光

（大连市中医医院，辽宁 大连 116013）

【摘要】目的：建立脑栓灵胶囊中黄芪甲苷的测定方法。方法：在入s=530 nm，入R==700 nm用薄层色谱扫描法测定黄芪甲苷的含量。结果：黄芪甲苷在1.07-5.34ug范围内线性关系良好(r=0.9994)，平均回收率为96.6％，RSD=1.9％(n=5)。结论：该法准确、可靠、灵敏度高、重现性好，可用于该制剂中黄芪甲苷的含量测定及质量控制。

【关键词】脑栓灵胶囊；黄芪甲苷；含量测定

脑栓灵胶囊是由西洋参、黄芪、牛膝、赤芍等十三味中药组成的复方制剂，具有益气活血化瘀通络的作用。黄芪为方中主药，为了有效地控制产品质量，本文参考有关资料建立了薄层扫描法测定其黄芪甲苷的含量，并对3个批次脑栓灵胶囊中的黄芪甲苷含量进行测定，方法及结果如下。

1 仪器与试药

仪器：CS一9301PC薄层扫描仪(日本岛津CS一9301PC)；定量毛细管(美国Drum—mond厂出品)；硅胶G(青岛海洋化工厂)。

试药：黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制品检定所；甲醇、氯仿、正丁醇等试剂均为分析纯；脑栓灵胶囊由大连市中医医院制剂室制备。

2 方法与结果

2.1对照品溶液的制备  精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2供试品溶液的制备  取本品内容物3g精密称定，置索式提取器中，加甲醇适量，冷浸过夜，加热回流提取4h，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次20ml，弃去氨夜，正丁醇液蒸干，残渣加水3-5ml使溶解，放冷，通过D_101型大孔吸附树脂柱（内径105cm，长12cm，约5g），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继续用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3层析条件选择  照薄层色谱法(中国药典2000版一部VIB)试验，吸取供试品溶液4ul，对照品溶液2ul、4ul，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13:6:2）（10℃以下放置过夜）下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃烘约5-7分钟，至斑点显色清晰。

2.4扫描条件及参数  通过对样品、对照品、阳性药材和阴性药材的扫描确定条件为：入s=530 nm，入R==700 nm，反射式锯齿扫描，狭缝1.2×1.2mm²，SX=3，灵敏度中。

2.5测定方法的考察

2.5.1线性关系

  精密吸取黄芪甲苷对照品溶液（每1ml含1.07mg）1、2、3、4、5ul分别点于同一G薄层板上，按上述层析条件上行展开，显色后按以上仪器参数扫描测定，得回归方程：Y=-0.3578+0.3732×10^-3X，其中r=0.9994(n=5),结果表明黄芪甲苷在1.07-5.34ug之间呈良好的线性关系。

2.5.2稳定性试验

精密吸取对照品溶液4ul ，点样，展开，显色后每隔15分钟扫描一次，连续扫描5次，记录斑点面积积分值，结果表明本品在1 h内基本上稳定，相对偏差为0.91%。

2.5.3精密度试验

  精密吸取供试品溶液4ul5份，分别点于同一薄层板上，依法展开，显色，扫描测定，结果相对偏差为0.82%，精密度较好。

2.5.4回收率试验

  精密称取已知含量的脑栓灵胶囊样品5份，分别添加黄芪甲苷对照品适量，按照样品测定项下进行处理并测定，计算回收率（见表1）。结果表明，本法回收率较好。

表1 回收率试验结果

2.5.5样品含量测定

取不同批号的3批脑栓灵胶囊内容物1g，精密称定，并按上述方法操作，采用外标两点法测定其黄芪甲苷的含量，结果见表2.

表2 脑栓灵胶囊中黄芪甲苷的含量测定结果

根据上述数据，依据标准差上下限，故规定本制剂中黄芪甲苷的含量不少于0.028（即＞0.28mg/g）

3讨论

黄芪在处方中为君要，黄芪甲苷又是黄芪的典型成分，所以通过对黄芪甲苷的含量测定来控制本制剂的质量。因西洋参含有皂苷，因而相互干扰较大，所以在样品前处理时采用大孔吸附树脂洗脱，有效去除了各种杂质与干扰成分。采用比较先进而精密的双波长薄层扫描方法对黄芪甲苷的含量加以测定，测得黄芪甲苷的含量不得少于0.028%。因此，该方法操作简单、重现性好、回收率高，为保证其制剂质量提供了可靠的依据。

参考文献：

【1】康廷国等 中成药薄层色谱鉴定 人民卫生出版社（北京）1995

【2】陈发奎等 常用中草药有效成分含量测定 人民卫生出版社（北京）1997